Srovnání vodivostních detektorů pro kapilární elektroforézu

Abstract

Bakalářská práce se týká srovnání dvou bezkontaktních vodivostních detektorů v kapilární elektroforéze. Pro tento účel byly využity dvě metody, metoda stanovení glukózy, fruktózy a sacharózy a poté metoda stanovení anorganických aniontů. Teoretická část popisuje kapilární elektroforézu jako takovou, a dále specifické využití vodivostních detektorů v kapilární elektroforéze a optimalizaci podmínek pro detekci. Dále obsahuje údaje, které jsou využívány pro srovnání detektorů, a poté i popis různých metod, které mohou být využity pro dělení sacharidů a anorganických aniontů. V experimentální části je popsána optimalizace jednoho z detektorů a následné srovnání detektorů Admet a TraceDec. Nejdříve probíhala separace sacharidů na krátkém konci v 40mmol∙l−1 hydroxidu sodném, při napětí −15kV. Pro kvantifikaci byla použita metoda vnitřního standardu. Jako standard byla do vzorků přidávána laktóza s koncentrací 0,1 mg∙ml−1 . Byla změřena kalibrační závislost v rozsahu 0,01 až 0,5 mg∙ml−1 a určena její linearita, a poté mez detekce, mez stanovitelnosti, které se pohybovaly kolem 0,005 mg∙ml−1 , resp. 0,015 mg∙ml−1 , a opakovatelnost relativních ploch, výšek píků a jejich migračních časů s relativními směrodatnými odchylkami v rozmezí od 3 % do 6 % pro detektor Admet a od 2 % do 4 % pro detektor TraceDec....

The aim of this bachelor thesis is comparison of two contactless conductivity detectors in capillary electrophoresis. Two methods were used for comparison: The determination of saccharides, namely glucose, fructose and sucrose, and then the determination of inorganic ions, such as chlorides, nitrates, and sulphates. The theoretical part deals with capillary electrophoresis in general and then the specific use of a contactless conductivity detector in capillary electrophoresis and its optimization. Parameters used for comparison of detectors such as limit of detection or relative standard deviation are described. Afterwards, different methods that can be used for the separation and determination of saccharides and inorganic ions are reviewed. The experimental part contains data that were measured in the optimization part of this study as well as comparison of the two detectors used, Admet and TraceDec. The comparison part starts with the method for the separation of saccharides using short-end injection mode in 40mmol∙l−1 sodium hydroxide with a separation voltage of −15 kV. The internal standard was 0,1mg∙ml−1 lactose. The calibration curve was measured in the concentration range from 0,01 to 0,5 mg∙ml−1 The linearity was measured with values of LOD, LLOQ and RSD determined as well. The values of...