Průtoková cytometrie pro in vitro testy chemosenzitivity a rezistence nádorů (CSRA)

Abstract

In vitro chemosensitivity and resistance assay determine the sensitivity of a specific tumor after a specific treatment administration in an experimental setup. A heterogeneous population of cancer cells is exposed to various approved anticancer drugs in short-term ex vivo and their combination thereof. The effect of each drug is then determined based on the viability of specific tumor cells allowing for individual patient treatment using a precise combination of drugs. This approach is an example of the personalized medicine principle, which is focusing on the adjustment of diagnostic procedures and treatment of a specific patient. Therefore, its goal is to avoid treatment failure in patients with poor response to the statistically most effective treatments based on randomized clinical trials. The number of viable cells determined by the flow cytometry provides very accurate statistics for multiparametric analysis. A necessary prerequisite is the presence of dissociated cancer cells in a single cell suspension. This is different from cloning methods, where tumor colonies grow on agar media, or from histocultures, which are specific with its three-dimensional tissue cultivation. We can also sort cells from suspension based on their pre-defined attributes for their subsequent functional testing. The...

In vitro testy chemosenzitivity a rezistence ("Chemosensitivity and resistance assay" - CSRA) nádorů stanovují citlivost konkrétního nádoru k daným léčebným postupům v experimentálním uspořádání. Heterogenní populace nádorových buněk je ex vivo krátkodobě vystavená působení různých schválených léčiv a jejich kombinací. Následně je stanoven vliv jednotlivých léků na životnost konkrétních nádorových buněk, podle níž je možné zvolit přesnou kombinaci léčiv pro každého pacienta individuálně. Tento přístup je příkladem personalizované medicíny, která se zabývá přizpůsobení diagnostických postupů a léčby konkrétnímu pacientovi, a tím se snaží zamezit selhání léčby u pacientů, u kterých nefungují statisticky nejúčinnější léčebné postupy, založené na randomizovaných klinických testech. Množství určování živých buněk pomocí průtokové cytometrie poskytuje velice přesnou statistiku pro multiparametrickou analýzu. Nezbytnou podmínkou je ovšem přítomnost disociovaných nádorových buněk v jednobuněčné suspenzi. Tím se tato metoda liší od klonovacích metod, kdy kolonie nádorových buněk rostou na agarových médiích, nebo od histokultur, které se vyznačují trojrozměrnou kultivací tkáně. Následně také můžeme roztřídit buňky podle jejich předem definovaných vlastností pro jejich další funkční testování. Výhodou těchto...