Hyaluronan-degrading enzymes and their utilization as tools for the preparation of oligosaccharides and derivatives
Enzymy degradující hyaluronan a jejich využití jako nástroje pro přípravu oligosaccharidů a derivatů
dizertační práce (OBHÁJENO)

Zobrazit/otevřít
Trvalý odkaz
http://hdl.handle.net/20.500.11956/196562Identifikátory
SIS: 209577
Kolekce
- Kvalifikační práce [4588]
Autor
Vedoucí práce
Konzultant práce
Jílková, Jana
Oponent práce
Kameník, Zdeněk
Wimmerová, Michaela
Fakulta / součást
1. lékařská fakulta
Obor
Microbiology
Katedra / ústav / klinika
Ústav lékařské mikrobiologie 1. LF UK a VFN
Datum obhajoby
21. 1. 2025
Nakladatel
Univerzita Karlova, 1. lékařská fakultaJazyk
Angličtina
Známka
Prospěl/a
Klíčová slova (česky)
Kyselina hyaluronová, oligosacharidy, 13C-značená HA, β-glukuronidáza, bakteriální, mikrobiota oMM12, Bacteroides, průmyslové využitíKlíčová slova (anglicky)
Hyaluronan, oligosaccharides, 13C- labeled HA, β-glucuronidase, bacterial strains, oMM12 microbiota, Bacteroides, industrial useHyaluronan (HA) je jednoduchý glykosaminoglykan, který se nachází ve všech tkáních obratlovců jako základní složka extracelulární matrix. Jeho molekulová hmotnost se může lišit od několika megaDaltonů až po méně než jeden kiloDalton. Na základě své velikosti získává četné biologické vlastnosti a lze jej tak využít v kosmetickém a farmaceutickém průmyslu pro různé aplikace. Tato výzkumná oblast se v současné době zabývá dvěma hlavními výzvami, kterými jsou: A) Vývoj nových nástrojů pro analýzu a přípravu nových a nákladově efektivních produktů HA. Enzymatické nástroje hrají klíčovou roli ve vývoji nových materiálů na bázi HA. Kategorií takových slibných enzymů jsou β-D-glukuronidázy (β-GUS). β- GUS katalyzují hydrolýzu zbytku kyseliny β-D-glukuronové z neredukujícího konce různých substrátů. Nicméně nedostatek specifity vůči HA u většiny β-GUS spolu s vysokou cenou a nízkou čistotou těch β-GUS, které jsou aktivní na HA, brání jejich široké aplikaci. Cílem této studie bylo prozkoumat β-GUS z Bacteroides fragilis (rBfGUS). Abychom toho dosáhli, zaměřili jsme se na vývoj procesů produkce (upstream) a purifikace a imobilizace (downstream) rekombinantní formy rBfGUS a prozkoumali jsme parametry její aktivity a kinetiku. Naše zjištění naznačují, že jsme vyvinuli proces s vysokou výtěžností produkce...