Vývoj UHPLC metody pro stanovení withanolidů v potravních doplňcích na bázi extraktu z Ashwagandhy

Abstract

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Bc. Eliška Vašutová Supervisor: prof. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Title of the diploma thesis: Development of UHPLC method for the determination of withanolides in dietary supplements with Ashwagandha extract In this diploma thesis, a new ultra high-performance liquid chromatography (UHPLC) method was developed and validated for the separation and determination of withaferin A, withanolide A, withanolide B, withanoside IV, withanoside V and withanone, which are contained in the extracts of Withania somnifera, commonly known as Ashwagandha. The developed method was subsequently used to determine the withanolides in ten dietary supplements: Ashwagandha BIO Organic (Blendea), Ashwagandha (ActiveLab), Ashwagandha (Kräuterhaus Sanct Bernahrd), Ashwagandha Extract Organic BIO (Viridian), Ashwagandha (Green Idea), Ashwagandha (ADVANCE nutraceutics), Ashwagandha (Gym Beam), Ashwagandha (Webber Naturals), Ashwagandha (Vilgain) a Ashwagandha (Jíme zdravě). A Kinetex F5 100 Å 150 x 4.6 mm analytical column with 2.6 µm particles was used for the analysis. The analysis was carried out by gradient elution with mobile phase A: acetonitrile, mobile phase B: ultrapure water. The analysis was carried out at a...

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Eliška Vašutová Školitel: prof. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj UHPLC metody pro stanovení withanolidů v potravních doplňcích na bázi extraktu z Ashwagandhy Tato diplomová práce se zabývala vývojem a validací metody ultravysokoúčinné kapalinové chromatografie (UHPLC) pro separaci a stanovení látek withaferinu A, withanolidu A, withanolidu B, withanosidu IV, withanosidu V a withanonu, které jsou obsaženy v extraktech z Vitánie snodárné, běžně označované jako Ashwagandha. Vyvinutá metoda byla následně aplikována k určení obsahu zmíněných withanolidů v deseti potravních doplňcích: Ashwagandha BIO Organic (Blendea), Ashwagandha (ActiveLab), Ashwagandha (Kräuterhaus Sanct Bernahrd), Ashwagandha Extract Organic BIO (Viridian), Ashwagandha (Green Idea), Ashwagandha (ADVANCE nutraceutics), Ashwagandha (Gym Beam), Ashwagandha (Webber Naturals), Ashwagandha (Vilgain) a Ashwagandha (Jíme zdravě). Pro analýzu byla použita kolona Kinetex F5 100 Å 150 x 4,6 mm s částicemi o velikosti 2,6 μm. Byla využita gradientová eluce s mobilní fází A: acetonitril a mobilní fází B: ultračistá voda. Analýza probíhala při konstantní teplotě 30 řC a rychlost průtoku mobilní fáze činila 1,0 ml/min. Detekce...