Vývoj a validace HPLC metody pro stanovení benzokainu a kyseliny salicylové v přípravku Herbadent

Abstract

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Bc. Kristýna Škvorová Fialová Supervisor: prof. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Title of the diploma thesis: Development and validation of HPLC method for the determination of benzocaine and salicylic acid in Herbadent preparation. A high performance liquid chromatography method was used and validated to determine benzocaine and salicylic acid in Herbadent preparation. The method used gradient elution with 0.1% formic acid and acetonitrile. For separation was used column Ascentis® Express 90Å RP-Amide, 150 x 3.0 mm, 2.7 µm particle size. The analysis was performer using a temperature 30 řC and flow rate 1 ml/min. For detection were chosen wavelength of 289 nm and 305 nm. The method was validated. The validation parameters were measured and calculated with following results: linearity for benzocaine 0.9992 and for salicylic acid 0.9994, repeatability for benzocaine 0.41 % and for salicylic acid 0.38 %, accuracy for benzocaine 1.33 % and for salicylic acid 1.00 % and precision for benzocaine 2.37 % and for salicylic acid 2.41 %. The amount of substances in tested solutions was found to be 1.59 mg/ml of benzocaine and 9.97 mg/ml of salicylic acid. Keywords: HPLC, benzocaine, salicylic acid, determination

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Kristýna Škvorová Fialová Školitel: prof. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj a validace HPLC metody pro stanovení benzokainu a kyseliny salicylové v přípravku Herbadent. V této práci byla vyvinuta HPLC metoda pro současné stanovení benzokainu a kyseliny salicylové v přípravku Herbadent roztok na dásně. Analýza probíhala za podmínek gradientové eluce za použití 0,1% kyselina mravenčí a acetonitrilu. Jako stacionární fáze byla použita kolona Ascentis® Express 90Å RP-Amide, 150 x 3,0 mm, 2,7 µm částice. Analýza probíhala při teplotě 30 řC a průtoku 1 ml/min. Pro detekci byly zvoleny vlnové délky 289 nm a 305 nm. Následně byla metoda validována. Validační parametry byli změřeny a vyhodnoceny s následujícími výsledky: linearita s korelačním koeficientem pro benzokain 0,9992 a pro kyselinu salicylovou 0,9994, opakovatelnost analýzy vyjádřená jako RSD pro benzokain 0,41% a pro kyselinu salicylovou 0,38%, přesnost pro benzokain 1,33% a pro kyselinu salicylovou 1,00% a preciznost pro benzokain 2,37% a pro kyselinu salicylovou 2,41%. Množství obsahových látek v testovacích roztocích bylo zjištěno 1,59 mg/ml benzokainu a 9,97 mg/ml kyseliny salicylové. Klíčová slova: HPLC, benzokain,...