Studies applied to bioscience research using liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry (LC-MS/MS)

Abstract

Felipe Martínez Ramírez - Ph.D. Thesis abstract in Czech: "Studie aplikované na biologický výzkum za užití kapalinové chromatografie v tandemu s hmotnostní spektrometrií (LC-MS/MS)" Tato práce se zaměřuje na aplikaci kapalinové chromatografie ve spojení s tandemovou hmotnostní spektrometrií (LC-MS/MS) v biologickým výzkumu. Primárním cílem bylo vyvinout a ověřit robustní metody založené na LC-MS/MS pro posouzení klíčových analytických problémů v oblastech jako jsou lipidomika, farmakokinetika a environmentální zdraví. Studium bioaktivních lipidů bylo zaměřeno na estery mastných kyselin a hydroxymastných kyselin (FAHFA) v jedlých houbách. Necílené a cílené metody LC-MS/MS umožnily identifikaci jedinečných lipidových profilů, což podpořilo jejich použití jako chemotaxonomických markerů. Tento duální přístup poskytl detailní strukturální pohled a usnadnil druhovou diferenciaci. Ve studii metabolismu léčiv bylo LC-MS/MS spojeno s jaterním systémem Organ-on-a-Chip (OoC) pro hodnocení metabolismu tolbutamidu a jeho metabolitu, 4-hydroxytolbutamidu. Systém automatizované filtrace a zpětného proplachu filtru (AFFL) byl vyvinut pro zlepšení manipulace se vzorky a minimalizaci efektů matrice. Metoda validovaná FDA prokázala linearitu, selektivitu, vysokou preciznost, přesnost a reprodukovatelnost, a nabízí tak...