Analýza eskulinu, eskuletinu a fenylefrinu v očních kapkách pomocí micelární elektrokinetické chromatografie

Abstract

Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Lucie Pincová Školitel: Doc. RNDr. Marie Pospíšilová, CSc. Název diplomové práce: Analýza eskulinu, eskuletinu a fenylefrinu v očních kapkách pomocí micelární elektrokinetické chromatografie V diplomové práci byla vyvinuta a validována nová metoda micelární elektrokinetické chromatografie s UV detekcí pro současnou separaci a stanovení eskulinu, eskuletinu a fenylefrinu. Separace byla optimalizována testováním parametrů jako je typ, koncentrace a pH základního elektrolytu, koncentrace ionogenního smáčedla dodecylsíranu sodného (SDS) a methanolu a vliv vloženého napětí a teploty. Separace probíhala v nepotažené křemenné kapiláře (vnitřní průměr 50 µm, celková délka 64,5 cm, efektivní délka 8,5 cm), s využitím UV detekce při 210 nm a hydrodynamickým dávkováním při tlaku −50 mbar po dobu 6 sekund. Optimální podmínky pro separaci a stanovení účinných látek byly následující: základní elektrolyt 20mM kyselina boritá upravená 100mM NaOH na pH 8,6, který obsahoval 60 mM SDS a 5 % (V/V) methanolu. Jako vnitřní standard byla použita kyselina benzoová (0,1 mg/ml). Teplota kapiláry byla udržována na 25 řC, vkládané napětí činilo −25 kV. Kalibrační závislosti byly lineární pro 10−500 µg/ml eskulinu a...

Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Lucie Pincová Supervisor: Doc. RNDr. Marie Pospíšilová, CSc. Title of Diploma Thesis: Analysis of aesculin, aesculetin and phenylephrine in eye drops by micellar electrokinetic chromatography A new method of micellar electrokinetic chromatography with UV detection for the simultaneous determination of aesculin, aesculetin and phenylephrine was devised and validated. The separation was optimized by examining a number of experimental conditions, such as type, concentration and pH of the background electrolyte, the addition of a surface-active agent (sodium dodecyl sulfate, SDS) and methanol and effect of applied voltage and operating temperature. The separation was carried out in a fused-silica capillary (internal diameter 50 µm, total length 64.5 cm and effective length 8.5 cm) with UV detection at 210 nm, using hydrodynamic injection under the pressure of −50 mbar for 6 seconds. Optimal conditions for the separation and determination of the drugs were: background electrolyte 20mM boric acid of pH 8.6 (adjusted with 100mM NaOH) containing 60 mM SDS and 5 % (V/V) of methanol. Benzoic acid (0.1 mg/ml) was used as internal standard. The capillary temperature was maintained at 25 řC, the...