Immunohistochemická analýza exprese SMAD proteinů u experimentální aterogeneze

Abstract

Magdalena Lasotová Imunohistochemická analýza exprese SMAD proteinů u experimentální aterogeneze Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Farmacie Cíl práce: Sledovali jsme vliv atorvastatinu na expresi fosforylované formy SMAD 3 v aterosklerotických plátech u ApoE/LDL receptor deficitních myší. Metody: Bylo použito 16 samic ApoE/LDL receptor deficitních myší kmene C57BL/6J. Zvířata byla náhodně rozdělena do dvou skupin. Po dobu 8 týdnu byly obě skupiny krmeny standardní dietou. Zvířata druhé skupiny dostávala v potravě navíc atorvastatin v dávce 50 mg/1kg/den. Dále byly odebrány vzorky krve pro biochemickou analýzu. Stanovení lipidů v aterosklerotických lézích jsme provedli pomocí histologického barvení olejovou červení. Pro imunohistochemickou analýzu byly použity vzorky obsahující semilunární chlopně s aortou. Pro detekci exprese SMAD 3 proteinu byla použita metodika Avidin-Biotin (ABC) s detekcí pomocí DAB. Výsledky: Podávání atorvastatinu vedlo k signifikantnímu zvýšení hladin cholesterolu a VLDL cholesterolu. Navzdory hypercholesterolemickému účinku atorvastatinu došlo k poklesu velikosti aterosklerotických plátů. Imunohistochemická analýza prokázala expresi fosforylované formy SMAD 3 proteinu v celé stěně aorty včetně endotelu, plátu a cévní medie....

Magdalena Lasotová Immunohistochemical analysis of expression of SMAD proteins in experimental atherogenesis. Diploma thesis Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Pharmacy Background: We observed the effect of atorvastatin on the expression of phosphorylated form of SMAD 3 in atherosclerotic plaques of ApoE / LDL recep- tor deficient mice. Methods: We used C57BL/6J female mice with double deficiency of apolipopro- tein E and LDL receptor. Animals were divided into two groups. For 8 weeks bo- th groups were fed a standard diet. Animals of the second group received addi- tion of atorvastatin 50 mg/1 kg/day. Blood samples were taken for biochemical analysis. Histological staining with oil red we have taken for the determination of lipids in atherosclerotic lesions. For immunohistochemical analysis were used samples containing semilunar valves with aorta. Detection of expression of SMAD 3 protein was performed using Avidin-Biotin method (ABC) with detecti- on using DAB. Results: Administration of atorvastatin significantly increased level of total cho- lesterol and VLDL cholesterol. Despite hypercholesterolemic effect the adminis- tration of atorvastatin resulted in significant reductions of atherosclerotic lesi- ons compared with the control group. Immunohistochemical...