Cytotoxicity of mycotoxins in vitro methods using CHO-K1 cells

Abstract

I. SOUHRN Účelem této práce bylo určit, zda mykotoxiny produkované plísní rodu Fusarium, mohou působit cytotoxicky na savčí buňky CHO-K1. V této studii byly testovány tři mykotoxiny produkované rodem Fusarium: beauvericin (BEA), deoxynivalenol (DON) a T-2 toxin. Jejich schopnost působit cytotoxicky byla hodnocena zkouškou s neutrální červení. Buňky CHO-K1 byly vystaveny různým koncentracím mykotoxinů BEA, DON a T-2 v různých inkubačních časech. Rozsah poškození buňky byl hodnocen testem s neurální červení po 24, 48 a 72 hodinové inkubaci s danými mykotoxiny. Současně byla sledována životnost buněk, které byly vystaveny směsím dvou nebo tří jmenovaných mykotoxinů. V této práci byly zaznamenány významné rozdíly mezi testovanými směsmi. Bylo námi prokázáno, že všechny jednotlivě testované mykotoxiny (BEA, DON, T-2 toxin) redukují životnost buněk CHO-K1. Jednotlivé mykotoxiny snižují životashopnost ve zvyšujícím se pořadí: BEA<DON<T-2 toxin. Naše výsledky ukazují, že buňky CHO-K1 jsou velmi citlivé k T-2 toxinu. T-2 vykazuje nejsilnější cytotoxickou odpověd vůči testované buňečné linii. Získané výsledky signalizují, že buněčná linie CHO-K1, vykazuje závislot cytotoxicity na expozičním čase a koncentraci mykotoxinu. Naše výsledky demonstrují, že T-2 toxin byl shledán více cytotoxickým v průběhu času, což je v...

The purpose of this study was to determine the capacity of three Fusarium mycotoxins: BEA, DON, T-2 toxin, to induce cytotoxicity using the mammalian CHO-K1 cells by the NR assay. CHO-K1 cells were exposed to several concetrations of DON, BEA and T-2 toxin and several incubation times. The extent of cell injury was assessed by NR uptake assay, after an incubation period of 24, 48 and 72h. Moreover, the viability of CHO-K1 cells was measured in the presence of a mixture of two or three of the mycotoxins. Significant differences were observed between the compounds tested. All toxins, DON, BEA and T-2 toxin, tested individually diminish cell viability. Individual mycotoxins reduce viability in increasing order: BEA<DON<T-2 toxin. Our results show that CHO-K1 cells are extremely sensitive to T-2 toxin. T-2 toxin exhibited the most cytotoxic response against the cell line tested. Results obtained indicate that CHO-K1 cell line, exhibited a time and concentration- dependent cytotoxicity. Our results demonstrated that the T-2 toxin was found to be more cytotoxic during the exposure period, which was totally in agreement with the data previously published. The aim of this study was also to evaluate the cytotoxicity of low concentrations of mycotoxin combinations on CHO-K1 cells. We have studied the...