Konjugáty oligonukleotidů s fotodynamicky aktivními a fluorescenci zhášejícími molekulami azaftalocyaninů

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Farmaceutické chemie a kontroly léčiv Diplomová práce Konjugáty oligonukleotidů s fotodynamicky aktivními a fluorescenci zhášejícími molekulami azaftalocyaninů Řešitel: Hana Göringerová Vedoucí diplomové práce: PharmDr. Miroslav Miletín PhD. Tato diplomová práce se zabývá možnostmi vytvoření konjugátů oligonukleotidů s fotodynamicky aktivními nebo fluorescenci zhášejícími molekulami azaftalocyaninů. Žádané konjugáty se nám podařilo vytvořit použitím CuI -katalyzované Huisgenovy 1,3-dipolární alkyn azidové cykloadice, což je nejčastěji používaná metoda click chemie. Během této reakce byl použit oligonukleotid, o sekvenci 25T modifikovaný hexynylem, navázaný na pevné fázi. Za katalýzy CuI v prostředí THF (případně DMSO) a DIPEA byl zmíněný oligonukleotid konjugován k barvivu P14-1Zn. Produkt této reakce byl charakterizován měřením UV-VIS spektrofotometru a MALDI-TOF analýzou. Ostatní postupy, které byly v rámci této diplomové práce provedeny, se ukázaly neúspěšnými, protože nedošlo k navázání barviva k oligonukleotidu na pevné fázi.

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmaceutical Chemistry and Drug Control Diploma thesis Conjugates of oligonucleotides with photodynamic or fluorescence quenching azaphthalocyanine molecules Author: Hana Göringerová Supervisor: PharmDr. Miroslav Miletín PhD. This thesis deals with possibilities of creating conjugates of oligonucleotides with photodynamic or fluorescence quenching azaphthalocyanine molecules. We created this conjugates by using Copper (I)-catalyzed Huisgen 1,3-dipolar cycloadditions of terminal alkynes and azides which is the most often used method of click chemistry. Oligonucleotides on solid phase with sequence of 25T modified by hexynyl were utilized during this reaction. These oligonucleotides on solid phase reacted with P14-1Zn dye with CuI as catalyst and THF (DMSO) as a solvent. Products of this reaction were characterized by UV-VIS spectrophotometer and MALDI-TOF analysis. Others procedures which were made within our thesis, turn out to be unsuccessful. The problem was that the dye did not conjugate to oligonucleotides on solid phase.