Moderné prístupy pri úprave biologických vzoriek pred LC-MS analýzou

Abstract

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmaceutical Chemistry and Pharmaceutical Analysis Candidate: Mgr. Adam Reguli Supervisor: doc. PharmDr. Petra Štěrbová, Ph.D. Title: Advances in the sample preparation of biological matrices for LC-MS analysis Sample preparation is one of the most important steps in the LC-MS analysis of drugs in biological material. Conventional extraction techniques (protein precipitation, liquid-liquid extraction, solid-phase extraction) are traditionally used for this purpose; however, increasing emphasis is now placed on the use of more environmentally friendly microextraction methods. Another important trend is the miniaturization of sample collection, known as microsampling, which is used in both clinical practice and preclinical studies. This approach is less invasive, does not require trained personnel, and significantly reduces patient stress. In the case of dry microsamples, analyte stability is also improved, and sample transport is simplified. In preclinical studies, microsampling significantly reduces the number of animals needed for the study (especially small rodents such as mice), improves data quality, and is in line with the "3R" principle (refine, reduce, and replace). This dissertation thesis focuses on the development...

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Farmaceutickej Chémie a Farmaceutickej Analýzy Kandidát: Mgr. Adam Reguli Školiteľ: doc. PharmDr. Petra Štěrbová, Ph.D. Názov: Moderné prístupy pri úprave biologických vzoriek pred LC-MS analýzou Úprava vzorky predstavuje jeden z najdôležitejších krokov pri LC-MS analýze liečiv v biologickom materiáli. Na tento účel sa tradične využívajú konvenčné spôsoby extrakcie (proteínová precipitácia, extrakcia kvapalina-kvapalina, extrakcia na tuhej fáze), avšak v súčasnosti je dôraz kladený na využívanie environmentálne prijateľnejších mikroextrakčných metód. Ďalším významným trendom je miniaturizácia odberu vzorky, tzv. mikrovzorkovanie, ktoré nachádza uplatnenie v klinickej praxi aj v predklinických štúdiách. Ide o menej invazívny spôsob odberu, nevyžadujúci prítomnosť vyškoleného personálu, čo výrazne znižuje stres pacienta. V prípade suchých mikrovzoriek sa zároveň zlepšuje stabilita analytov a zjednodušuje transport vzoriek. V predklinických štúdiách ide o prístup, ktorý významne redukuje počet zvierat potrebných na štúdiu (najmä v prípade malých hlodavcov ako sú myši), zlepšuje kvalitu získaných dát a je v súlade s "3R" princípom (zdokonaliť, redukovať a nahradiť). Táto dizertačná práca sa zameriava na vývoj bioanalytických metód...