Vývoj a optimalizace 2DLC metody pro stanovení silymarinu

Abstract

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Monika Sipková Supervisor: doc. PharmDr. Petr Chocholouš, Ph.D. Title of diploma thesis: Development and optimization of 2D LC method for determination of silymarin The thesis describes the development and optimization of three analytical methods for the determination of silymarin content. The first developed method was 1DLC, its aim was to achieve the best possible quality of separation. The analysis was performed on a YMC - Triart C-18 ExRS 100 x 3.0 mm 1.9 µm column. The separation was carried out in gradient elution mode, methanol was chosen as the organic component, the aqueous component was diluted phosphoric acid, pH 2.0. The duration of the analysis was 15 min, at 30řC and a flow rate of 0.3 ml/min. The substances were detected at a wavelength of 280 nm. The second method developed was 1DLC, which provided the initial conditions for the subsequent 2D analysis. The analysis was performed on an Ascentis® Express ES-CN 100 x 3.0 mm 2.7 µm column. Separation was in gradient elution mode, with methanol as the organic component and diluted phosphoric acid pH 2.0 as the aqueous component. The length of analysis was 15 min, at 30řC and a flow rate of 0.15 ml/min. The substances were detected at a...

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Monika Sipková Školitel: doc. PharmDr. Petr Chocholouš, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj a optimalizace 2D LC metody pro stanovení silymarinu Práce popisuje vývoj a optimalizaci tří analytických metod pro stanovení obsahových látek silymarinu. První vyvinutá metoda byla 1D LC, jejím cílem bylo dosáhnout nejlepší možnou kvalitu separace. Analýza proběhla na koloně YMC - Triart C-18 ExRS (100 x 3,0 mm; 1,9 µm). Separace probíhala gradientovou elucí, jako organická složka byl zvolen methanol, vodnou složku představovala zředěná kyselina fosforečná o pH 2,0. Délka analýzy byla 15 minut, při teplotě 30 řC a průtokové rychlosti 0,3 ml/min. Látky byly detekovány při vlnové délce 280 nm. Druhá vyvinutá metoda byla 1D LC, která poskytla výchozí podmínky pro následnou analýzu ve 2 D. Analýza proběhla na koloně Ascentis® Express ES-CN (100 x 3,0 mm; 2,7 µm). Separace probíhala gradientovou elucí, jako organická složka byl zvolen methanol, vodnou složku představovala zředěná kyselina fosforečná o pH 2,0. Délka analýzy byla 15 minut, při teplotě 30 řC a průtokové rychlosti 0,15 ml/min. Látky byly detekované při vlnové délce 215 nm. Třetí vyvinutá metoda byla 2D LC, která dále separovala frakce odebrané z druhé...