Chirální SFC/MS analýza izomerů monoacylglycerolů a diacylglycerolů

Abstract

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department: Department of Pharmaceutical Chemistry and Pharmaceutical Analysis Candidate: Nela Štěrbová Supervisor: doc. PharmDr. Radim Kučera, Ph.D. Consultant: doc. Ing. Miroslav Lísa, Ph.D. Title of diploma thesis: Chiral SFC/MS analysis of monoacylglycerol and diacylglycerol isomers The distinction of lipid isomers is continuously gaining more attention in lipidomics due to their different biochemical properties in the organism. This work aimed to develop a method for the analysis of glycerolipids and their isomers in biological samples using supercritical fluid chromatography with mass spectrometry detection (SFC/MS). The isomers of monoacylglycerols (MG) and diacylglycerols (DG) were studied because they are biologically essential lipids with a variety of regioisomers and enantiomers. The application of chiral columns alone led to a certain degree of separation of MG and DG isomers, but the selectivity of glycerolipid classes was low and could not be improved by mobile phase modifier composition or other chromatographic conditions. The coelution of MGs and DGs with highly concentrated triacylglycerols (TG) in the biological samples distorted the MS peak area ratio of enantiomers. Therefore, the coupling of chiral and achiral columns was...

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Katedra farmaceutické chemie a farmaceutické analýzy Kandidát: Nela Štěrbová Vedoucí diplomové práce: doc. PharmDr. Radim Kučera, Ph.D. Konzultant diplomové práce: doc. Ing. Miroslav Lísa, Ph.D. Název diplomové práce: Chirální SFC/MS analýza izomerů monoacylglycerolů a diacylglycerolů Rozlišení izomerů lipidů získává v lipidomice stále více pozornosti díky jejich odlišným biochemickým vlastnostem v organismu. Podstatou této práce byl vývoj metody pro analýzu izomerů lipidů v biologických vzorcích za použití chirální superkritické fluidní chromatografie s hmotnostně spektrometrickou detekcí (SFC/MS). Pro studium byly vybrány izomery monoacylglycereolů (MG) a diacylglycerolů (DG) jako zástupci biologicky významných lipidů, které poskytují velké množství polohových izomerů a enantiomerů. Použití samotných chirálních kolon vedlo k určité separaci izomerů MG a DG, ale selektivita pro třídy glycerolipidů nebyla dostatečná a zlepšení nebylo dosaženo ani změnou modifikátoru mobilní fáze nebo jiných chromatografických podmínek. Kvůli koeluci izomerů MG a DG s triacylglyceroly (TG), které jsou v biologických vzorcích ve vysokých koncentracích, docházelo ke zkreslení poměru ploch píků izomerů pomocí MS. Z tohoto důvodu bylo pro zlepšení...