Monitorování metabolismu diklofenaku v reálném čase

Abstract

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of analytical chemistry Candidate: Michaela Váňová Supervisor: doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Title of diploma thesis: Monitoring of diclofenac metabolism in real time This diploma thesis focuses on the optimization of experimental parameters of an analytical method for the sensitive and selective determination of diclofenac (DCF) using sequential injection analysis (SIA) in combination with spectrofluorimetric detection. The tested parameters influencing the determination of DCF using a complex with cyclodextrin (CD) include the selection of CD concentration, the DCF:CD ratio, the control program, the time interval between sample preparation and measurement, EX/EM bandwidth, calibration range, and storage conditions (container material and temperature regime). The optimized method is subsequently applied to real samples originating from a metabolic study and compared with data obtained from these samples using a reference off-line method of liquid chromatography with mass spectrometric detection (LC-MS). The results of this work demonstrate that the SIA method, in combination with spectrofluorimetry, generates results comparable to LC-MS in terms of analytical evaluation of DCF concentration decrease, thus approaching the...

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Michaela Váňová Školitel: doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Název diplomové práce: Monitorování metabolismu diklofenaku v reálném čase Tato diplomová práce je zaměřena na optimalizaci experimentálních parametrů analytické metody pro citlivé a selektivní stanovení diklofenaku (DCF) využívající sekvenční injekční analýzu (SIA) ve spojení se spektrofluorimetrickou detekcí. Mezi testované parametry, které ovlivňují stanovení DCF s využitím komplexu s cyklodextrinem (CD) patří volba koncentrace CD, poměr DCF : CD, ovládací program, doba mezi přípravou roztoků a jejich měřením, šířka EX/EM pásu, kalibrační rozsah a podmínky uchovávání (materiál nádoby a teplotní režim). Optimalizovaná metoda je následně aplikována na reálné vzorky pocházející z metabolické studie a porovnána s daty měření těchto vzorků získanými referenční off-line metodou kapalinové chromatografie s hmotnostní detekcí (LC-MS). Výsledky této práce ukazují, že SIA metoda ve spojení se spektrofluorimetrií generuje srovnatelné výsledky s LC-MS v rámci analytického hodnocení snížení koncentrace DCF, a tudíž se přibližuje k citlivosti a přesnosti, jaké nabízí LC-MS metoda. Práce se současně zaměřuje na aplikaci této metody pro monitorování obsahu...