Stanovení neopterinu a kreatininu v suché kapce moči pro využití v klinickém výzkumu a praxi

Abstract

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Bc. Lea Vyleťalová Supervisor: assoc.prof. RNDr. Lenka Kujovská Krčmová, Ph.D. Consultant: MSc. Chaweewan Suwanvecho Title of the diploma thesis: Determination of neopterin and creatinine in dried urine spot for clinical research and practice The theoretical part of this thesis summarizes all the knowledge concerning the different microsampling methods and discusses their advantages and disadvantages. Basic information about the determined analytes - neopterin and creatinine, their properties, and relationship are also included. A short literature review about determining neopterin by the dried spot method and brief information on liquid chromatography and its modern modifications are presented. In the experimental part of this thesis, successful development and validation of a new method for the determination of neopterin and creatinine in dry urine spots was performed, including the optimization of the extraction procedure, the mobile phase, and the inclusion of an internal standard into the analysis. A phosphate buffer mixture of c = 15 mmol/L, pH = 6.45 with a gradient of 7% acetonitrile was selected as the most suitable mobile phase. A coupled monolithic Chromolith® SpeedRod RP-18e, 50 x 4.6...

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Lea Vyleťalová Školitel: doc. RNDr. Lenka Kujovská Krčmová, Ph.D. Konzultant: MSc. Chaweewan Suwanvecho Název diplomové práce: Stanovení neopterinu a kreatininu v suché kapce moči pro využití v klinickém výzkumu a praxi V teoretické části této diplomové práce jsou shrnuty veškeré poznatky týkající se rozdílných metod mikrovzorkování spolu s jejich výhodami a nevýhodami. Rovněž jsou zde zahrnuty základní informace o stanovovaných látkách - neopterinu a kreatininu, o jejich vlastnostech a vzájemném vztahu. Součástí je krátká literární rešerše o stanovení neopterinu metodou suché kapky a stručné informace o kapalinové chromatografii a jejích moderních modifikacích. V experimentální části této diplomové práce jsou prezentovány výsledky vývoje a validace nové metody stanovení neopterinu a kreatininu v suché kapce moči - optimalizace využívaného extrakčního postupu, mobilní fáze a zařazení interního standardu do analýzy. Jako nejvhodnější mobilní fáze byla vybrána směs fosfátového pufru o c = 15 mmol/l, pH = 6,45 s gradientem 7 % acetonitrilu. K analýze byla využita spojená monolitická kolona Chromolith SpeedRod RP-18e, 50  4.6 mm s Chromolith Performance RP-18e, 150  3.0 mm. Kreatinin byl zaznamenán...