Stanovení kombinačních indexů fotochemické internalizace saporinu (light-after přístup)

Abstract

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Bc. Dominika Daničová Supervisor: RNDr. Miloslav Macháček, Ph.D. Consultant: Mgr. Magdaléna Kozlíková Title of Diploma Thesis: Determination of combination indexes of photochemical internalization of saporin (light-after approach) Photochemical internalization (PCI) represents a promising strategy for targeted delivery of macromolecular therapeutics. It exploits the localization of a photosensitizer in endosomal membranes and its light activation to facilitate the release of therapeutic agents into the cytoplasm. Unlike photodynamic therapy (PDT), which relies on the direct oxidative damage of the cells, PCI enables efficient intracellular delivery of compounds that would otherwise be unable to cross the plasma membrane, thereby broadening the scope of targeted therapies. This thesis is focused on evaluating the efficiency of saporin internalization mediated by phthalocyanine-based photosensitizers P42-1ZnMe, P44-COOH, and P44-COONa. The experiments were conducted in vitro using human cervical cancer cell line HeLa, employing the PCI "light-after" protocol, in which irradiation follows the co-administration of the photosensitizer and the therapeutic agent (4 h drug-to-light interval). The aim of...

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Dominika Daničová Školitel: RNDr. Miloslav Macháček, Ph.D. Konzultant: Mgr. Magdaléna Kozlíková Název diplomové práce: Stanovení kombinačních indexů fotochemické internalizace saporinu (light-after přístup) Fotochemická internalizace (PCI) představuje slibnou strategii cíleného transportu makromolekulárních léčiv, která využívá lokalizaci fotosensitizéru v membránách endosomů a jeho aktivaci světlem za účelem uvolnění terapeutické látky do cytoplazmy. Na rozdíl od fotodynamické terapie, která je založená na přímém oxidativním poškození buněk, PCI umožňuje efektivní dodání látek s jinak velmi omezeným transportem přes cytoplasmatickou membránu do intracelulárního prostoru, čímž rozšiřuje možnosti cílené terapie. Tato diplomová práce se zaměřuje na hodnocení účinnosti internalizace modelového toxinu saporinu prostřednictvím ftalocyaninových fotosensitizérů P42-1ZnMe, P44- COOH a P44-COONa. Experimenty byly prováděny in vitro na lidské cervikální nádorové buněčné linii HeLa, přičemž je aplikován režim PCI light-after, kdy k ozařování dochází až po společném podání fotosensitizéru s terapeutikem (v našem případě 4 h inkubace). Cílem práce bylo stanovit hodnoty IC50, na základě kterých pak proběhly PI...