Ověření účinnosti albendazolpropargylu u Haemonchus contortus

Abstract

Vlasovka slezová (Haemonchus contortus) patří mezi nejvýznamnější patogenní hlístice, které napadají gastrointestinální trakt malých přežvýkavců. Způsobuje závažné onemocnění zvané hemonchóza, které vede k anémii, úhynům zvířat a značným ekonomickým ztrátám v chovech. Vzhledem k rozsáhlému a opakovanému používání anthelmintik, zejména benzimidazolů, dochází v posledních letech ke zvyšujícímu se výskytu kmenů H. contortus rezistentních na většinu tříd anthelmintik. S cílem odhalit mechanismy lékové rezistence u H. contortus a identifikovat proteiny interagující s anthelmintikem albendazolem (ABZ) byla syntetizována sonda albendazolpropargyl (pABZ). V této práci byl sledován vliv ABZ a pABZ na expresi vybraných genů u dospělců H. contortus. Dále byl sledován anthelmintický účinek ABZ a pABZ testováním jejich vlivu na životaschopnost dospělců H. contortus. Dospělci izolovaní ze slezu ovcí, byli roztřízeni podle pohlaví a následně inkubováni po dobu 4 hodin při 37 řC v médiu, které obsahovalo 0,1 µM ABZ nebo pABZ. Kontrolní vzorky byly inkubovány s médiu s přídavkem 0,1% DMSO. Po inkubaci byla pomocí kvantitativní qPCR změřena exprese vybraných genů. Při testu anthelmintického účinku ABZ a pABZ byly samičky a samečci inkubováni 24 hodin s mediem obsahujícím 10 µM ABZ nebo pABZ. Kontrolní vzorky byly...

Haemonchus contortus is one of the most significant pathogenic nematodes affecting the gastrointestinal tract of small ruminants. It causes a serious disease called haemonchosis, which leads to anemia, animal mortality, and considerable economic losses in livestock production. Due to the extensive and repeated use of anthelmintics, especially benzimidazoles, there has been a growing occurrence of H. contortus strains resistant to most classes of anthelmintics in recent years. To uncover the mechanisms of drug resistance in H. contortus and identify proteins interacting with the anthelmintic albendazole (ABZ), a probe called albendazole-propargyl (pABZ) was synthesized. This study monitored the effect of ABZ and pABZ on the expression of selected genes in adult H. contortus. In addition, the anthelmintic effect of ABZ and pABZ was evaluated by testing their impact on the viability of adult worms. Adults isolated from the abomasum of sheep were sorted by sex and incubated for 4 hours at 37 řC in medium containing 0.1 µM ABZ or pABZ. Control samples were incubated in medium with 0.1% DMSO. After incubation, the expression of selected genes was measured using quantitative qPCR. For the anthelmintic effect assay, males and females were incubated for 24 hours in medium containing 10 µM ABZ or pABZ....