Stanovení modulace zánětlivé imunitní odpovědi u kmenů Bifidobacterium longum izolovaných z biopsií dětí se zánětlivým střevním onemocněním

Abstract

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biological and Medical Sciences Author: Anežka Hlavatá Supervisor: RNDr. Klára Konečná, Ph.D. Consultant: Ing. Tomáš Hudcovic, CSc. Title of diploma: Determination of modulation of inflammatory immune response in Bifidobacterium longum strains isolated from biopsies of children with inflammatory bowel diseases Aim of the study: The aim of this study was to test 20 strains of Bifidobacterium longum isolated from biopsy tissue of young patients with a diagnosis of IBD or suspicion of IBD (aged 4-18 years) and to determine their ability to elicit or modulate immune responses using suitable cell models, such as the human Caco-2 cell line and the HEK293 cell line. Methods: Twenty strains of Bifidobacterium longum ssp. longum were cultured and subsequently heat- inactivated. Their ability to modulate immune responses was assessed using the Caco-2 cell line. An inflammatory response was induced by interleukin-1β, which was added to the Caco-2 cells in both prophylactic and therapeutic setups. Parallel experiments were conducted under non-inflammatory conditions (an immunomodulatory model without interleukin-1β). Control conditions included pure medium and PAM3CSK4 at various concentrations. Furthermore, signaling by these bacterial...

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Kandidátka: Anežka Hlavatá Školitelka: RNDr. Klára Konečná, Ph.D. Konzultant: Ing. Tomáš Hudcovic, CSc. Název diplomové práce: Stanovení modulace zánětlivé imunitní odpovědi u kmenů Bifidobacterium longum izolovaných z biopsií dětí se zánětlivým střevním onemocněním Cíl práce: Cílem této práce bylo otestovat 20 kmenů Bifidobacterium longum izolovaných z bioptické tkáně mladých pacientů s diagnózou zánětlivého střevního onemocnění nebo podezřením na zánětlivé střevní onemocnění (ve věku 4-18 let) a stanovit jejich schopnost vyvolat nebo modulovat imunitní odpověď na vhodných buněčných modelech, jako je lidská buněčná linie Caco-2 a linie HEK293. Metody: 20 kmenů Bifidobacterium longum ssp. longum bylo kultivováno a následně tepelně inaktivováno. Byla stanovena schopnost těchto kmenů modulovat imunitní odpověď v Caco-2 buněčné linii. Zánětlivá reakce byla vyvolána pomocí interleukinu-1β, který byl ke Caco-2 buňkám přidáván v profylaktickém a terapeutickém nastavení. Souběžně byly provedeny i experimenty v nezánětlivém nastavení (model imunomodulace bez interleukinu-1β). Jako kontrola bylo zařazeno čisté medium a PAM3CSK4 v různých koncentracích. Dále byla ověřována signalizace těchto bakteriálních kmenů s...