Využití alternativního zvířecího modelu, Galleria mellonella, pro výzkum kandidátních antifungálních léčiv

Abstract

Charles university, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biological and Medical Sciences Study program: Pharmacy Author: Kristýna Kučerová Supervisor: RNDr. Klára Konečná, Ph.D. Title of thesis: Employment of alternative animal model, Galleria mellonella, for candidate antifungal drugs research Background: The aim of this thesis was to establish the alternative animal model Galleria mellonella for the investigation of novel candidate antifungal agents. Pilot experiments were conducted to optimize key methodological procedures. The main antifungal therapy efficacy by testing treatment outcomes in an animal model with developed fungal infection. Methods: For the experiments, larvae of G. mellonella obtained from in-house breeding were used. Only fully vital larvae were selected for each experiment. The yeast Candida albicans strain ATCC 90028 was chosen for infection. The infectious inoculum was administered via injection using a needle through the last left proleg. Larvae were divided into two weight categories for the experiments: 350 ± 25 mg and 450 ± 25 mg. The HISS scoring system was used to assess larval health status. To determine the total fungal burden, larval bodies were homogenized and the resulting material was plated on selective medium, Sabouraud agar. To further quantify...

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Studijní obor: Farmacie Autor: Kristýna Kučerová Vedoucí práce: RNDr. Klára Konečná, Ph.D. Název diplomové práce: Využití alternativního zvířecího modelu, Galleria mellonella, pro výzkum kandidátních antifungálních léčiv Cíl práce: Cílem této diplomové práce bylo zavést alternativní zvířecí model, Galleria mellonella, pro výzkum nových kandidátních antifungálních agens. V rámci této práce byly provedeny pilotní experimenty zaměřené na optimalizaci jednotlivých metodických postupů. Snaha experimentálně zavést zcela inovativní přístup pro in vivo studium efektivity antifungální terapie - testování efektivity u zvířecího modelu s rozvinutým fungálním onemocněním. Metody: Pro experimenty byly použity larvy Galleria mellonella, které byly získany vlastním odchovem. K jednotlivým experimentům byly voleny pouze plně vitální larvy. K infekci zvířat byla zvolena kvasinka Candida albicans ATCC 90028. Infekční inokulum bylo aplikováno pomocí jehly přes poslední levou panožku. Do experimentů byla volena zvířata dvou váhových kategorií: 350±25 mg a 450±25 mg. K hodnocení zdravotního stavu larev byl použit skórovací systém HISS. Pro stanovení celkové infekční nálože byla provedena homogenizace těl larev, které bylo...