Vliv endoglinu na aktivaci jaterní fibrózy in vitro

Abstract

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Název diplomové práce: Vliv endoglinu na aktivaci jaterní fibrózy in vitro Autor: Adéla Brejčáková Vedoucí diplomové práce: PharmDr. Petra Fikrová, Ph.D. Jaterní fibróza je dynamický proces charakteristický přeměnou jaterních hvězdicovitých buněk (HSC) na proliferativní myofibroblasty. Endoglin, který je vysoce exprimovaný v HSC, je transmembránovým glykoproteinem a působí jako koreceptor pro vazbu na transformující růstový faktor β (TGF-β). Jeho zvýšená exprese je spojována s patologickými stavy a je tedy významným markerem nádorových onemocnění, kardiovaskulárních onemocnění a dalších. Z tohoto důvodu je endoglin cílovou molekulou pro terapeutické intervence. Carotuximab (TRC105) je monoklonální protilátka proti endoglinu. Váže se na sirotčí doménu endoglinu a ovlivňuje jeho signální dráhu prostřednictvím fosforylace SMAD. Cíl práce: Cílem práce bylo zjistit, zda je carotuximab schopný snížit expresi endoglinu a tím zamezit rozvoji, nebo omezit progresi jaterní fibrózy v lidských jaterních hvězdicovitých buňkách. Metody: Pro experimentální část jsme využili lidské HSC v pasáži č.3. Buňky byly kultivovány do dosažení 90% konfluence, poté byly ovlivněny médiem bez FBS obsahujícím 300 µg/ml TRC105 po...

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biological and Medical Science Title of Diploma Thesis: The impact of endoglin on the activation of liver fibrosis in vitro Author: Adéla Brejčáková Supervisor of Diploma Thesis: PharmDr. Petra Fikrová, Ph.D Liver fibrosis is a dynamic process characterized by the transformation of hepatic stellate cells (HSC) into proliferative myofibroblasts. Endoglin, which is highly expressed in HSC, is a transmembrane glycoprotein acting as a co-receptor for binding to Transforming Growth Factor β (TGF-β). It is increased expression is associated with pathological conditions and is thus a significant marker for tumor diseases, cardiovascular diseases, and others. For this reason, endoglin is a target molecule for therapeutic interventions. Carotuximab (TRC105) is a monoclonal antibody against endoglin. It binds to the orphan domain of endoglin and affects it is signalling pathway through SMAD phosphorylation. Aim: The aim of the study was to determine whether carotuximab is capable of reducing endoglin expression and thereby preventing the development or limiting the progression of liver fibrosis in human hepatic stellate cells. Methods: For the experimental part, we used human HSCs at passage number 3. The cells were cultured until...