Využití molekulárně biologické metody One-Step Nucleic Acid Amplification (OSNA) při vyšetření sentinelových lymfatických uzlin u pacientek s karcinomem endometria

Abstract

Hypothesis The One-Step Nucleic Acid Amplification method could represent an effective intraoperative tool for detection of metastatic involvement of lymphatic nodes on the level of ultrastaging in endometrial cancer patients. Objective Utilization of the One-Step Nucleic Acid Amplification (OSNA) molecular biology method for the detection of the micrometastatic and macrometastatic involvement of sentinel lymph nodes in endometrial cancer patients. The objective is a comparison with the conclusion of the histopathological ultrastaging of sentinel lymph nodes and a description of the clinical consequences of this method. Methods Patients indicated for the surgical treatment of endometrial cancer underwent the detection of sentinel lymph nodes that was executed using the intracervical application of a tracer. Nodes larger than 5 mm were cut into sections 2 mm thick parallel to the short axis of the node. Odd sections were examined using the OSNA method, while even ones were examined by hematoxylin and eosin (H&E) and immunohistochemical examination to detect cytokeratin 19 antibody (IHC CK19) based on an ultrastaging-relevant protocol. Nodes of the size of 5 mm and smaller were divided into halves along the longitudinal axis with one half being examined using the OSNA method and the other half by...

Hypotéza studie Metoda One-Step Nucleic Acid Amplification by mohla představovat efektivní intraoperativní nástroj detekce metastatického postižení lymfatických uzlin u pacientek s karcinomem endometria na úrovni ultrastagingu. Cíle práce Obsahem této práce je ověření využitelnosti molekulárně biologické metody One-Step Nucleic Acid Amplification (OSNA) pro detekci mikrometastatického a makrometastatického postižení sentinelových lymfatických uzlin u pacientek s karcinomem endometria pro klinickou praxi. Primárním cílem práce je srovnání závěrů metody OSNA se závěrem histopatologického ultrastagingu sentinelových uzlin. Mezi sekundární cíle patří vyjádření dopadu této metody na řazení pacientek do stádií dle FIGO klasifikace, vlastní úspěšnost detekce sentinelové uzliny a imuhohistochemické potvrzení exprese cytokeratinu 19 primárním tumorem u všech pacientek zařazených do studie. Pacientky a metody Pacientky indikované k operační léčbě pro karcinom endometria, které podepsaly informovaný souhlas se zařazením do studie, podstoupily detekci a exstirpaci sentinelových lymfatických uzlin. Ta proběhla pomocí intracervikální aplikace traceru. Uzliny> 5 mm byly prokrájeny po 2 mm paralelně ke krátké ose uzliny. Liché řezy byly vyšetřeny metodou OSNA, sudé hematoxylinem eozinem (H&E) a imunohistochemickým...